Monkeypox వైరస్ రియల్ టైమ్ PCR కిట్
వస్తువు యొక్క వివరాలు
నిశ్చితమైన ఉపయోగం
ఇది రియల్ టైమ్ పిసిఆర్ సిస్టమ్‌లను ఉపయోగించడం ద్వారా హ్యూమన్ సీరం లేదా లెసియన్ ఎక్సుడేట్ శాంపిల్స్‌లో మంకీపాక్స్ వైరస్‌ను గుర్తించడానికి ఉపయోగించబడుతుంది.
పరీక్ష సూత్రం
ఈ ఉత్పత్తి ఫ్లోరోసెంట్ ప్రోబ్-ఆధారిత Taqman® నిజ-సమయ PCR పరీక్షా వ్యవస్థ.Monkeypox వైరస్ యొక్క F3L జన్యువును గుర్తించడం కోసం నిర్దిష్ట ప్రైమర్లు మరియు ప్రోబ్‌లు రూపొందించబడ్డాయి.మానవ సంరక్షించబడిన జన్యువును లక్ష్యంగా చేసుకుని అంతర్గత నియంత్రణ తప్పుడు-ప్రతికూల ఫలితాలను నివారించడానికి నమూనా సేకరణ, నమూనా నిర్వహణ మరియు నిజ-సమయ PCR ప్రక్రియను పర్యవేక్షిస్తుంది.కిట్ పూర్తిగా ప్రీమిక్స్ లైయోఫైలైజ్డ్ సిస్టమ్, ఇందులో Monkeypox వైరస్ గుర్తింపు కోసం అవసరమైన పదార్థాలు ఉన్నాయి: న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ యాంప్లిఫికేషన్ ఎంజైమ్, UDG ఎంజైమ్, రియాక్షన్ బఫర్, నిర్దిష్ట ప్రైమర్ మరియు ప్రోబ్.
ప్రధాన విషయాలు
అందించిన భాగాలు పట్టికలో ఇవ్వబడ్డాయి.
| భాగాలు | ప్యాకేజీ | మూలవస్తువుగా |
| మంకీపాక్స్ వైరస్లియోఫిలైజ్డ్ ప్రీమిక్స్ | 8 స్ట్రిప్ PCR గొట్టాలు× 6 పర్సులు | ప్రైమర్లు, ప్రోబ్స్, dNTP/dUTP మిక్స్, Mg2+, Taq DNA పాలిమరేస్, UDG ఎంజైమ్ |
| MPV పాజిటివ్ కంట్రోల్ | 400 μL×1 ట్యూబ్ | టార్గెట్ జన్యువును కలిగి ఉన్న DNA సీక్వెన్సులు |
| MPV ప్రతికూల నియంత్రణ | 400 μL×1 ట్యూబ్ | మానవ జన్యు విభాగాన్ని కలిగి ఉన్న DNA శ్రేణులు |
| కరిగిపోయే పరిష్కారం | 1 mL×1 ట్యూబ్ | స్టెబిలైజర్ |
| అనుగుణ్యత ధ్రువపత్రం | 1 ముక్క | / |
ఆపరేషన్ ఫ్లో
1. నమూనాసేకరణ:స్టెరైల్ ట్యూబ్‌లలోకి అనుగుణంగా నమూనా సేకరించాలి
ప్రామాణిక సాంకేతిక లక్షణాలతో.
2. రీజెంట్ తయారీ (రియాజెంట్ తయారీ ప్రాంతం)
కిట్ యొక్క భాగాలను తీయండి, స్టాండ్‌బై ఉపయోగం కోసం గది ఉష్ణోగ్రత వద్ద వాటిని బ్యాలెన్స్ చేయండి.
3. స్పెసిమెన్ ప్రాసెసింగ్ (నమూనా ప్రాసెసింగ్ ప్రాంతం)
3.1 న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత
వైరల్ DNA వెలికితీత కిట్‌ల సంబంధిత అవసరాలు మరియు విధానాల ప్రకారం, న్యూక్లియిక్ యాసిడ్ వెలికితీత కోసం 200μL ద్రవ నమూనాలు, పాజిటివ్ కంట్రోల్ మరియు నెగటివ్ కంట్రోల్ తీసుకోవాలని సిఫార్సు చేయబడింది.
3.2 లైయోఫిలైజ్డ్ పౌడర్ కరిగించడం మరియు టెంప్లేట్ జోడింపు
నమూనాల సంఖ్య ప్రకారం Monkeypox వైరస్ లియోఫిలైజ్డ్ ప్రీమిక్స్‌ను సిద్ధం చేయండి.ఒక నమూనాకు లైయోఫిలైజ్డ్ ప్రీమిక్స్ పౌడర్ ఉన్న ఒక PCR ట్యూబ్ అవసరం.ప్రతికూల నియంత్రణ & సానుకూల నియంత్రణను రెండు నమూనాలుగా పరిగణించాలి.
(1) లైయోఫిలైజ్డ్ ప్రీమిక్స్‌ని కలిగి ఉన్న ప్రతి PCR ట్యూబ్‌లో 15μL డిసాల్వింగ్ సొల్యూషన్‌ను జోడించండి, ఆపై ప్రతి PCR ట్యూబ్‌లో వరుసగా 5μL ఎక్స్‌ట్రాక్ట్ చేయబడిన నమూనాలు/నెగటివ్ కంట్రోల్/పాజిటివ్ కంట్రోల్‌ని జోడించండి.
(2) PCR ట్యూబ్‌లను గట్టిగా కవర్ చేయండి, లైఫైలైజ్డ్ పౌడర్ పూర్తిగా కరిగిపోయి, మిళితం అయ్యే వరకు PCR ట్యూబ్‌లను చేతితో ఫ్లిక్ చేయండి, తక్షణమే తక్కువ-స్పీడ్ సెంట్రిఫ్యూగేషన్ ద్వారా PCR ట్యూబ్‌ల దిగువకు ద్రవాన్ని సేకరించండి.
(3) గుర్తింపు కోసం సాధారణ రియల్-టైమ్ PCR పరికరాన్ని ఉపయోగిస్తే, PCR ట్యూబ్‌లను నేరుగా యాంప్లిఫికేషన్ ప్రాంతానికి బదిలీ చేయండి;గుర్తించడం కోసం BTK-8ని ఉపయోగిస్తే, ఈ క్రింది కార్యకలాపాలను నిర్వహించాలి: PCR ట్యూబ్ నుండి BTK-8 యొక్క ప్రతిచర్య చిప్‌కు 10 μL ద్రవాన్ని బదిలీ చేయండి.ఒక PCR ట్యూబ్ చిప్‌లోని ఒక బావికి అనుగుణంగా ఉంటుంది.పైపెట్ ఆపరేషన్ సమయంలో, పైపెట్ 90 డిగ్రీల నిలువుగా ఉండేలా చూసుకోండి.ఏరోసోల్ అవరోధం పైపెట్ చిట్కాలను మితమైన శక్తితో బావి మధ్యలో ఉంచాలి మరియు పైపెట్ మొదటి గేర్‌కు చేరుకున్నప్పుడు (బుడగలను నివారించడానికి) దానిని నెట్టడం ఆపాలి.బావులు నిండిన తర్వాత, అన్ని బావులను కవర్ చేయడానికి రియాక్షన్ చిప్ మెంబ్రేన్‌ను తీయండి మరియు చిప్ తర్వాత యాంప్లిఫికేషన్ డిటెక్షన్ ప్రాంతానికి బదిలీ చేయబడుతుంది.
4. PCR యాంప్లిఫికేషన్ (డిటెక్షన్ ఏరియా)
4.1 PCR ట్యూబ్‌లు/రియాక్షన్ చిప్‌ను రియాక్షన్ ట్యాంక్‌లో ఉంచండి మరియు ప్రతి ప్రతిచర్య పేర్లను సంబంధిత క్రమంలో బాగా సెట్ చేయండి.
4.2 గుర్తింపు ఫ్లోరోసెన్స్ సెట్టింగులు: (1) Monkeypox వైరస్ (FAM);(2) అంతర్గత నియంత్రణ (CY5).
4.3 కింది సైక్లింగ్ ప్రోటోకాల్‌ను అమలు చేయండి
ABI7500 ప్రోటోకాల్, బయో-రాడ్ CFX96, SLAN-96S, QuantStudio:
| దశలు | ఉష్ణోగ్రత | సమయం | చక్రాలు | |
| 1 | ప్రీ-డినాటరేషన్ | 95℃ | 2 నిమిషాలు | 1 |
| 2 | డీనాటరేషన్ | 95℃ | 10 సె | 45 |
| ఎనియలింగ్, ఎక్స్‌టెన్షన్, ఫ్లోరోసెన్స్ అక్విజిషన్ | 60℃ | 30 సె | ||
BTK-8 ప్రోటోకాల్:
| దశలు | ఉష్ణోగ్రత | సమయం | చక్రాలు | |
| 1 | ప్రీ-డినాటరేషన్ | 95℃ | 2 నిమిషాలు | 1 |
| 2 | డీనాటరేషన్ | 95℃ | 5 సె | 45 |
| ఎనియలింగ్, ఎక్స్‌టెన్షన్, ఫ్లోరోసెన్స్ అక్విజిషన్ | 60℃ | 14 సె | ||
5. ఫలితాల విశ్లేషణ (దయచేసి ఇన్‌స్ట్రుమెంట్ యూజర్ మాన్యువల్‌ని చూడండి)
ప్రతిచర్య తర్వాత, ఫలితాలు స్వయంచాలకంగా సేవ్ చేయబడతాయి.విశ్లేషించడానికి "విశ్లేషణ చేయి" క్లిక్ చేయండి మరియు ఫలితం నిలువు వరుసలో ప్రతి నమూనా యొక్క Ct విలువలను పరికరం స్వయంచాలకంగా వివరిస్తుంది.ప్రతికూల మరియు సానుకూల నియంత్రణ ఫలితాలు క్రింది "6. నాణ్యత నియంత్రణ"కు అనుగుణంగా ఉండాలి.
6. నాణ్యత నియంత్రణ
6.1 ప్రతికూల నియంత్రణ: FAM ఛానెల్‌లో Ct లేదా Ct>40, సాధారణ యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్‌తో CY5 ఛానెల్‌లో Ct≤40.
6.2 సానుకూల నియంత్రణ: సాధారణ యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్‌తో FAM ఛానెల్‌లో Ct≤35, సాధారణ యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్‌తో CY5 ఛానెల్‌లో Ct≤40.
6.3 పైన పేర్కొన్న అన్ని ప్రమాణాలకు అనుగుణంగా ఉంటే ఫలితం చెల్లుతుంది.లేకపోతే, ఫలితం చెల్లదు.
ఫలితాల వివరణ
కింది ఫలితాలు సాధ్యమే:
| FAM ఛానెల్ యొక్క Ct విలువ | CY5 ఛానెల్ యొక్క Ct విలువ | వివరణ | |
| 1# | Ct లేదా Ct>40 లేదు | ≤40 | మంకీపాక్స్ వైరస్ నెగెటివ్ |
| 2# | ≤40 | ఏదైనా ఫలితాలు | మంకీపాక్స్ వైరస్ పాజిటివ్ |
| 3# | 40-45 | ≤40 | తిరిగి పరీక్ష;ఇది ఇప్పటికీ 40~45 అయితే, 1#గా నివేదించండి |
| 4# | Ct లేదా Ct>40 లేదు | Ct లేదా Ct>40 లేదు | చెల్లదు |
గమనిక: చెల్లని ఫలితం సంభవించినట్లయితే, నమూనా సేకరించి మళ్లీ పరీక్షించవలసి ఉంటుంది.
ఆర్డర్ సమాచారం
| ఉత్పత్తి నామం | పిల్లి.నం | పరిమాణం | నమూనా | షెల్ఫ్ జీవితం | ట్రాన్స్.& Sto.టెంప్ |
| Monkeypox వైరస్ రియల్ టైమ్ PCR కిట్ | B001P-01 | 48 పరీక్షలు/కిట్ | సీరం/ లెసియన్ ఎక్సుడేట్ | 12 నెలలు | -25～-15℃ |
